中国医科大学学报

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负向调节因子重编程诱导大鼠骨髓间充质干细胞向胰岛内分泌细胞分化的研究

李宏图1, 2,林学文1,李彩虹1,庞希宁1   

  1. 1. 中国医科大学国家卫生和计划生育委员会重点实验室,干细胞与再生医学教研室,沈阳 110013;2. 辽宁省计划生育科学研究院,国家 卫生和计划生育委员会遗传与生殖健康重点实验室,沈阳 110031
  • 收稿日期:2015-04-03 出版日期:2016-01-05 发布日期:2015-12-30
  • 通讯作者: 庞希宁,E-mail:pangxining@126.com
  • 作者简介:李宏图(1977 -),男,研究员,博士.
  • 基金资助:

    国家自然科学基金(81370883);国家基础研究资助项目(2012CB518 103);教育部博士基金(20132104110020);辽宁省科技厅博士启动基金(2014010534-301)

In vitro Reprogramming of Rat Bone Marrow Mesenchymal StemCells into Pancreatic Endocrine Cells by Negative Regulators

LI Hong-tu1, 2,LIN Xue-wen1,LI Cai-hong1,PANG Xi-ning1   

  1. 1.Key Laboratory of Cell Bilolgy,National Health and Family Planming Commission,Department of Stem Cells and Regenerative Medicine China Medical University,Shenyang 110013,China;2. Liaoning Province Research Institute of Family Planning,Key Laboratory of Reproductive Health and Medical Genetics,National Health and Family Planning Commission,Shenyang110031,China
  • Received:2015-04-03 Online:2016-01-05 Published:2015-12-30

摘要:

目的 重编程诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向胰岛内分泌细胞分化并探讨其可能的分化机制。方法 原代培养 的大鼠骨髓MSCs经分离、培养至第3代后,用负向调节因子Rest/Nrsf、Shh慢病毒干扰载体转染并培养10d,通过实时定量RT? PCR和免疫荧光检测胰岛细胞分化相关基因的表达。结果 MSCs慢病毒转染后,胰岛素、胰高血糖素及生长抑素的表达明显 升高,并表达胰岛内分泌细胞分化的相关基因。结论 通过转染shRest/Nrsf、shShh慢病毒载体能够诱导大鼠MSCs向胰岛内分 泌细胞分化,EGFR、ERK1、MMP以及PI3K等参与这一分化过程。

关键词: 骨髓间充质干细胞, 负向调节因子, 慢病毒载体, 胰岛内分泌细胞

Abstract:

Objective To induce insulin-producing cells from rat bone marrow- derived mesenchymal stem cellsMSCsin vitro by suppressing two repressor genes repressor element-1 silencing transcription factor/neuron- restrictive silencer factorRest/Nrsfand sonic hedgehogShh),and discuss the possible mechanism. Methods Rat bone marrow-derived MSCs were separated and cultured to the third generationand then transfected with the shRest/Nrsf and shShh lentivirus vectors and cultured for another ten days. Real-time quantitative RT-PCR and immune of luorescent assay were employed to detect related gene expression of islet cell differentiation. Results Insulinglucagon and somatostatin increased significantly after lentivirus transfectionand pancreas islet endocrine cell differentiation related genes were expressed . Conclusion Rat MSCs can be induced to islet endocrine cell differentiation by cotransfection of shRest/Nrsf and shShh lentivirus vectors. ERK1MMPEGFRPI3K are involved in this process of differentiation.

 

Key words: mesenchymal stem cells, negative regulators, lentivirus vector, pancreatic endocrine lineage cells

中图分类号: 

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