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中国医科大学学报 ›› 2016, Vol. 45 ›› Issue (3): 249-254.doi: 10.12007/j.issn.0258-4646.2016.03.015

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GANT61对食管鳞癌细胞上皮-间质转化作用的研究

王雷1,杜媛鲲2,王林1,米源1,王娜3   

  1. 河北医科大学 1第四医院胸二科,石家庄 050011;2期刊社,石家庄 050017;3第四医院河北省肿瘤研究所分子生物室,石家庄050011
  • 收稿日期:2015-09-10 出版日期:2016-02-29 发布日期:2016-02-24
  • 作者简介:王雷(1976 -),男,副教授,博士.
  • 基金资助:
    河北省科技厅科技计划(132077127D)

GANT61 Inhibits Epithelial-mesenchymal Transition in Esophageal Squamous Carcinoma

WANG Lei1,DU Yuan-kun2,WANG Lin1,MI Yuan1,WANG Na3   

  1. 1Department of Thoracic Surgery,the Fourth Hospital of Hebei Medical University,Shijiazhuang 050011,China;2Hebei Medical University Journal Department,Shijiazhuang 050017,China;3Division of Molecular Biology,Hebei Cancer Institute,the Fourth Hospital of Hebei Medical University,Shijiazhuang 050011,China
  • Received:2015-09-10 Online:2016-02-29 Published:2016-02-24

摘要: 目的 研究 GANT61 对人食管鳞癌细胞 OE21 和 KYSE-30 的上皮-间质转化的影响,同时使用 N-Shh 蛋白刺激 Hedgehog 通路作为阳性对照,探讨 GANT61 抗肿瘤机制。方法 实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测 GANT61 和 N-Shh 蛋白作用于 OE21 和 KYSE-30 细胞后 Gli1、Gli2、N-cadherin 和β-catenin 基因变化;Western blot 观察药物 GANT61 和 N-Shh 蛋白作用于 OE21 和 KYSE-30 细胞后对 Gli1、Gli2、N-cadherin 和β-catenin 蛋白表达的影响。划痕愈合试验观察 GANT61 和 N-Shh 蛋白作用于 OE21 和 KYSE-30 细胞后对细胞迁移侵袭能力的影响。结果 实时荧光定量 PCR 结果显示,GANT61 可以下调 OE21 和 KYSE-30 的 Gli-1 、Gli-2、N-cadherin 和β-cateninmRNA 表达;Western blot 显示 GANT61 可以下调 OE21 和 KYSE-30 的 Gli1 、Gli2、N- cadherin 和β-catenin 蛋白表达。划痕愈合试验显示 GANT61 导致 OE21 和 KYSE-30 细胞的迁移能力明显下降。应用 N-Shh 蛋白 可 以 上 调 OE21 和 KYSE-30 的 Gli1、Gli2 表 达 ,N-cadherin 和 β-catenin 表 达 ,同 时 促 进 OE21 和 KYSE-30 的 迁 移 能 力 。 结论 GANT61 通过下调 Hedgehog 信号转导通路中 Gli1 和 Gli2 的表达来影响食管鳞癌细胞上皮-间质转化能力,Gli 可成为抑制食管 鳞癌细胞转移新的有效的分子靶点。

关键词: 食管鳞癌, Hedgehog 信号通路, GANT61, Gli, 上皮-间质转化

Abstract: Objective To investigate the effect of GANT61 on epithelial - mesenchymal transition in the human esophageal squamous carcinoma cell lines OE21 and KYSE-30 and elucidate its mechanism. Simultaneously N-Shh proteins were applied to stimulate the Hedgehog pathway so as to evaluate the anti-tumorgenesis effect of GANT61. Methods The mRNA expression of Gli1 and Gli2 were detected after treatment of GANT61 or N- Shh by real time fluorescence quantitative PCR .The protein expression of N-cadherin and β-catenin were observed after treatment by Western blot assay. Wound-healing Assay was performed to assess the effect of GANT61 and N-Shh on migration. Results Real time fluorescence quantitative PCR revealed that GANT61 could inhibit the mRNA expression of Gli1,Gli2,N-cadherin and β-catenin in OE21 and KYSE-30 cell lines. Western blot assay showed that GANT61 reduced the protein expression of Gli1、Gli2,N-cadherin and β-catenin in OE21 and KYSE-30 cell lines. Compared with control group,GANT61 dramatically inhibited the capability of migration in both OE21 and KYSE-30 by wound-healing assay. N-Shh proteins could increase cell migration and up-regulated Gli1 and Gli2,N-cadherin and β-catenin mean and protein expression in OE21 and KYSE-30 cell lines. Conclusion GANT61 could effectively inhibit EMT in esophageal squamous carcinoma by diminishing the expression of Gli1 and Gli2 .Gli could be a new and potent molecular target for treating the esophageal squamous carcinoma.

Key words: esophageal squamous carcinoma, Hedgehog signal transduction pathway, GANT61, Gli, epithelial?mesenchymal transition

中图分类号: 

  • R665.3
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