中国医科大学学报

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中国医科大学学报 ›› 2016, Vol. 45 ›› Issue (5): 430–433.doi: 10.12007/j.issn.0258-4646.2016.05.012

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CTGF siRNA对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡的影响

丁爽,方芳,段宏梅,肖卫国   

  1. 中国医科大学附属第一医院风湿免疫科,沈阳 110001
  • 收稿日期:2015-09-15 出版日期:2016-05-30 发布日期:2016-05-09
  • 通讯作者: 肖卫国 E-mail:Xonet5670@163.com
  • 作者简介:丁爽(1981 -),女,讲师,博士.
  • 基金资助:
    辽宁省医学高峰建设工程专项经费(2010006)

Effect of CTGF siRNA on Apoptosis of Fibroblast-like Synoviocytes of Rheumatoid Arthritis

DING Shuang,FANG Fang,DUAN Hongmei,XIAO Weiguo   

  1. Department of Rheumatology and Immunology,The First Hospital,China Medical University,Shenyang 110001,China
  • Received:2015-09-15 Online:2016-05-30 Published:2016-05-09

摘要: 目的 小干扰 RNA 技术沉默结缔组织生长因子(CTGF)表达,并观察对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)凋亡及对部分凋亡相关基因的影响。方法 脂质体转染 CTGF siRNA 至 FLS,real time PCR 筛选出有效的 CTGF siRNA。使 FLSCTGF 表达沉默后,采用 FITC-PI 双染法通过流式细胞仪检测对 FLS 凋亡的影响。Real-time PCR 检测 CTGF 基因沉默对 bax、bcl-xl 和 survivin 等凋亡相关基因表达的影响。结果 筛选出 H-1 序列是针对人 CTGF 的特异性 SiRNA,抑制率>70%。在外源性CTGF 作用下,由去血清导致的 FLS 凋亡明显减少;沉默 FLS 中的 CTGF 基因表达,FLS 的凋亡明显增加。在 FLS 中 CTGF 基因表达沉默后,Bax 基因表达上调,bcl-xl 基因表达下调,但差异没有统计学意义( P > 0.05)。survivin 基因表达出现明显下调(P <0.01)。结论 CTGF 减少 RA FLS 凋亡的保护性作用很可能是通过维持 survivin 表达来实现的。

关键词: 结缔组织生长因子, 成纤维样滑膜细胞, 凋亡

Abstract: Objective To silence the expression of CTGF by small interfering RNA technology,to observe the influence on fibroblast-like synovial cell apoptosis and several apoptosis-related genes,and to explore the mechanism of action of CTGF in rheumatoid arthritis synovial lesions. Methods Effective CTGF siRNA was screened through real-time PCR. The influence of CTGF siRNA on FLS apoptosis was detected with FITC-PI double staining by flow cytometry. bax,bcl-xl and survivin were detected using real-time PCR when CTGF mRNA has been silenced. ResultsCompared with other 2 groups of oligo and NC oligo,H1 oligo exhibited the strongest interfering action to CTGF(inhibition ratio>70%),so that it is selected as the effective target gene sequence for the following experiment. Apoptosis of FLS induced by serum deprivation was significantly decreased in the presence of exogenous CTGF. When expression of the CTGF gene was knocked down in FLS,FLS apoptosis was significantly increased,and expression levels of survivin mRNA were decreased significantly(P < 0.01). Conclusion FLS survival is positively regulated by CTGF,which may through the sustaining the expression of survivin.

Key words: connective tissue growth factor, fibroblast-like synoviocytes, apoptosis

中图分类号: 

  • R593.22
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