中国医科大学学报

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中国医科大学学报 ›› 2016, Vol. 45 ›› Issue (10): 918–922.doi: 10.12007/j.issn.0258-4646.2016.10.013

• 论著 • 上一篇    下一篇

siRNA 下调 Gli 基因表达对食管鳞癌 KYSE-30 细胞生物学行为的影响

王雷 1,杜媛鲲 2,刘庆熠 1,米源 1,廖海江 1,王娜 3,王林 1   

  1. 河北医科大学 1 第四医院胸二科,石家庄 050011;2 期刊社,石家庄 050017;3 第四医院分子生物学研究室,石家庄 050011
  • 收稿日期:2016-01-19 出版日期:2016-10-30 发布日期:2016-10-11
  • 作者简介:王雷(1976 -),男,主任医师,博士 .
  • 基金资助:
    河北省科技厅科技计划(132077127D);河北省卫生厅医 学科学研究重点课题(20160177)

Effects of Gli Silencing with Small Interfering RNA on the Malignant Biological Behavior of Esophageal Squamous Carcinoma KYSE-30 Cells

WANG Lei1,DU Yuankun2,LIU Qingyi1,MI Yuan1,LIAO Haijiang1,WANG Na3,WANG Lin1   

  1. 1 Department of Thoracic Surgery,The Fourth Hospital of Hebei Medical University,Shijiazhuang 050011,China;2 Department of Periodical Magazine,Hebei Medical University,Shijiazhuang 050017,China;3 Department of Molecular Biology,The Fourth Hospital of Hebei Medical University,Shijiazhuang 050011,China
  • Received:2016-01-19 Online:2016-10-30 Published:2016-10-11

摘要: 目的 探讨 Gli 表达下调对食管鳞癌 KYSE-30 细胞周期分布和上皮-间质转化能力的影响及其分子机制。方法 将 Gli1 和 Gli2 siRNA 和 空 白 对 照 siRNA 分 别 转 染 KYSE - 30 细 胞 48 h,实 时 荧 光 定 量 PCR 法 检 测 Gli1、Gli2 mRNA 表 达 水 平 ; Western blot 法检测 KYSE-30 细胞 Gli1 、Gli2 、Cyclin D1、Cyclin D2、p21、波形蛋白(Vimentin)和 β-catenin 蛋白的表达;流式细胞 术检测 KYSE-30 细胞周期分布;Transwell 侵袭实验检测细胞侵袭能力。结果 与空白对照 siRNA 组相比,Gli1 和 Gli2 siRNA 可 明显抑制 KYSE-30 细胞 Gli1、Gli2 mRNA 和蛋白表达,下调 Cyclin D1 、Cyclin D2、Vimentin 和 β-catenin 蛋白的表达和增加 p21 蛋 白表达,将细胞周期阻滞在 G0 /G1 期并降低细胞的侵袭能力,差异均有统计学意义(P < 0.01)。结论 Gli 蛋白表达可能在食管 鳞癌的发生发展中具有重要作用,下调 Gli1 和 Gli2 表达可导致食管鳞癌细胞增殖、细胞周期分布和上皮-间质转化能力的改 变,这可能与 Cyclin D1 、Cyclin D2、p21、Vimentin 和 β-catenin 蛋白变化相关。

关键词: 食管鳞癌, Gli, 细胞周期, 上皮-间质转化

Abstract: Objective To detect the expression of Gli in esophageal squamous carcinoma,and to analyze the effects of down-regulation of Gli expression on malignant biological behavior of esophageal squamous carcinoma KYSE-30 cells,so as to explore their molecular mechanisms. Methods Gli1,Gli2 siRNA and control siRNA were transfected into KYSE-30 cells for 48 h,respectively. The mRNA expression of Gli 1 and Gli 2 were detected by real time fluorescence quantitative PCR method. The protein expression of Gli 1,Gli 2,Cyclin D1,Cyclin D2,p21,Vimentin and β-catenin were observed by Western blot assay. The cell cycle were determined by flow cytometry. Transwell chambers were adopted to detect invasion ability. Results Compared with control siRNA,Gli1 & Gli2 siRNA could inhibit the mRNA and protein expression of Gli1,Gli2 in KYSE-30 cells,which down-regulate the protein expression of Cyclin D1,Cyclin D2,Vimentin,β-catenin,and enhance p21 expression.Downregulation of Gli1,Gli2 could arrest cell cycle at G0 /G1 phase and reduce cell invasion ability(P < 0.01). Conclusion Gli may play orchestral role in the development of esophageal squamous carcinoma.The down-regulation of Gli expression can lead to changes in the proliferation,cell cycle and invasion of esophageal squamous carcinoma,which may be associated with Cyclin D1,Cyclin D2,p21,Vimentin and β-catenin proteins.

Key words: esophageal squamous carcinoma, Gli, cell cycle, epithelial-mesenchymal transition

中图分类号: 

  • R734.2
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