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中国医科大学学报 ›› 2017, Vol. 46 ›› Issue (2): 140-144.doi: 10.12007/j.issn.0258-4646.2017.02.010

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5-Aza-CdR 对 DU145 前列腺癌细胞系 RNF180 基因去甲基化作用的初步研究

王海光,姜华茂,左知润,龙湟哲,袁观远,贾凡振   

  1. 锦州医科大学附属第一医院泌尿外科,辽宁 锦州 121001
  • 收稿日期:2016-07-06 出版日期:2017-02-28 发布日期:2017-01-17
  • 通讯作者: 姜华茂 E-mail:lyyyjhm@163.com
  • 作者简介:王海光(1990 -),男,硕士研究生 .

Preliminary Study on the Effect of 5-Aza-CdR on the Demethylation of RNF180 in Prostate Cancer Cell Line DU145

WANG Haiguang,JIANG Huamao,ZUO Zhirun,LONG Huangzhe,YUAN Guanyuan,JIA Fanzhen   

  1. Department of Urology,The First Affiliated Hospital,Jinzhou Medical University,Jinzhou 121001,China
  • Received:2016-07-06 Online:2017-02-28 Published:2017-01-17

摘要: 目的 通过观察去甲基化药物 5-Aza-CdR 对 DU145 前列腺癌细胞系 RNF180 基因的影响,探讨前列腺癌细胞系中肿瘤抑制基因 RNF180 失活的机制和原因 。方法 运用 MTT 法检测不同浓度(0、1、2、5、10、15、20 μmoI/L)5-Aza-CdR 对前列腺癌细 胞增殖能力的影响,同时筛选出 1 个最适药物浓度(5 μmoI/L);分别采用 Western blotting、实时 PCR、甲基化特异性 PCR(MSP)法 检测最适药物浓度处理前后前列腺癌细胞中 RNF180 的表达情况。结果 在一定范围内,5-Aza-CdR 对前列腺癌细胞 DU145 增 殖能力的影响随着药物浓度的增加和药物处理时间的增长而加强(P < 0.05);最适药物浓度处理后的前列腺癌细胞中 RNF180 蛋白及 mRNA 的表达量比处理前明显升高(P < 0.05),而启动子区的甲基化程度明显降低。结论 5-Aza-CdR 能够逆转 RNF180 基因在 DU145 前列腺癌细胞中的高甲基化状态,解除 RNF180 基因表达沉默的状态。

关键词: 5-Aza-CdR, 前列腺癌, RNF180, 去甲基化

Abstract: Objective To investigate the mechanism and cause of the inactivation of tumor suppressor gene RNF180 in prostate cancer cell line by observing the effect of 5-Aza-CdR on the RNF180 gene in prostate cancer cell line DU145. Methods MTT method was adopted to study the effect of 5-Aza-CdR(0,1,2,5,10,15 and 20 μmoI/L)on the proliferation of prostate cancer cells. Western blotting,real-time PCR,and methylation specific PCR(MSP)were separately used to detect the expression of RNF180 in prostate cancer cells before and after the treatment of the most suitable drug concentration(5 μmoI/L). Results In a certain range,the effect of 5-Aza-CdR on the proliferation of prostate cancer cell line DU145 was increased with the increase of drug concentration and the time of drug treatment(P < 0.05). After the treatment of the most suitable drug concentration,the protein and mRNA expression of RNF180 in prostate cancer cells was significantly increased(P < 0.05),but the methyla- tion of the promoter region was obviously decreased. Conclusion 5-Aza-CdR can reverse the methylation status of RNF180 gene in DU145 prostate cancer cell line,and relieve the silencing status of RNF180 gene expression.

Key words: 5-Aza-CdR, prostate cancer, RNF180, demethylation

中图分类号: 

  • R737.25
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