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中国医科大学学报 ›› 2017, Vol. 46 ›› Issue (4): 309-312.doi: 10.12007/j.issn.0258-4646.2017.04.006

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人巨细胞病毒 UL145 相互作用蛋白的筛选和功能分析

邹飞 1,2,王爽 1,吴思 1,孙峥嵘 1   

  1. 1. 中国医科大学附属盛京医院生物样本库,沈阳 110004;2. 吉林大学第一医院儿科,长春 130021
  • 收稿日期:2016-10-12 出版日期:2017-04-30 发布日期:2017-04-19
  • 通讯作者: 孙峥嵘 E-mail:sunzr@sj?hospital.org
  • 作者简介:邹飞(1983 -),女,主治医师,硕士 .
  • 基金资助:
    国家自然科学基金(81171581)

Screening and Analysis of Proteins Interacting with HCMV UL145 from a Human Fetal Brain cDNA Library

ZOU Fei1,2,WANG Shuang1,WU Si1,SUN Zhengrong1   

  1. 1. BioBank,Shengjing Hospital,China Medical University,Shenyang 110004,China;2. Department of Pediatrics,The First Hospital of Jilin University,Changchun 130021,China
  • Received:2016-10-12 Online:2017-04-30 Published:2017-04-19

摘要: 目的 应用酵母双杂交系统筛选与人巨细胞病毒(HCMV)UL145 编码蛋白相互作用的来源于人胎脑 cDNA 文库的组织蛋白。方法 采用聚合酶链式反应扩增 HCMV UL145 片段,酶切及纯化扩增的目的片段及酵母表达载体 pGBKT7,连接 HCMV UL145 片段及载体 pGBKT7,将连接后的重组诱饵表达载体 pGBKT7-UL145 转化到酵母菌 AH109 中,再将人胎脑文库 DNA 也转 化到酵母 AH109 中,筛选与 HCMV UL145 编码蛋白相互作用的蛋白,并对阳性克隆进行测序和生物信息学分析。结果 最终 确认多个克隆与 HCMV UL145 编码蛋白相互作用,BLAST 结果显示 3 个与 FOXG1 高度同源。结论 利用酵母双杂交系统成功 筛选出与 HCMV UL145 编码蛋白相互作用的人胎脑 cDNA 文库蛋白 FOXG1,推测该目的蛋白在 HCMV 感染所致神经系统损伤 过程中起重要作用。

关键词: 人巨细胞病毒, UL145 蛋白, 酵母双杂交系统, 人胎脑 cDNA 文库

Abstract: Objective To screen a human fetal brain cDNA library for proteins that can interact with HCMV UL145 using a yeast two-hybrid system. Methods A bait plasmid(pGBKT7-UL145)was constructed.Using HCMV UL145 as bait,a human fetal brain cDNA library was screened and proteins interacting with UL145 were identified using bioinformatic methods to sequence and analyze the positive clones. Results Three clones interacting with HCMV UL145 were found,and identified as FOXG1. Conclusion Several proteins interacting with HCMV UL145 in the human fetal brain cDNA library were identified as FOXG1,indicating that this protein may play an important role in the course of HCMV infection.

Key words: human cytomegalovirus, UL145 protein, yeast two-hybrid system, human fetus brain cDNA library

中图分类号: 

  • R373
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