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中国医科大学学报 ›› 2017, Vol. 46 ›› Issue (8): 713-719.doi: 10.12007/j.issn.0258-4646.2017.08.010

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卡铂短期诱导人卵巢癌类干细胞的分离及初步鉴定

王宁,倪莎,周欣   

  1. 中国医科大学附属盛京医院妇产科,沈阳 110004
  • 收稿日期:2017-05-08 出版日期:2017-08-30 发布日期:2017-08-24
  • 通讯作者: 周欣 E-mail:zhouxin001@medmail.com.cn
  • 作者简介:王宁(1990 -),女,硕士研究生 .
  • 基金资助:
    辽宁省教育厅重点实验室项目(LS201602);沈阳市科技 创新专项资金—人口与健康科技攻关专项(F15?139?9?34)

Isolation and Identification of Human Ovarian Cancer Stem-like Cells Induced by Short-term Treatment with Carboplatin

WANG Ning,NI Sha,ZHOU Xin   

  1. Department of Obstetrics and Gynecology,Shengjing Hospital,China Medical University,Shenyang 110004,China
  • Received:2017-05-08 Online:2017-08-30 Published:2017-08-24

摘要: 目的 分离卡铂耐药型人卵巢癌类干细胞,为研发和筛选针对卡铂耐药的卵巢癌二线治疗药物提供细胞模型。方法 从卵巢癌组织或腹水中分离培养卵巢癌细胞,直接或采用卡铂短期诱导后无血清悬浮培养,分离纯化获得卵巢癌类干细胞球,采用免疫荧光法或流式细胞术检测干细胞标志物的表达。结果 卵巢癌原代细胞直接或采用卡铂短期诱导后无血清悬浮培养 能够形成类干细胞球,并高表达干细胞标记物 CD133,ALDH1,ABCG2 和 CD24。卡铂短期诱导分离的卵巢癌干细胞球中 CD24+ 细胞含量明显增加。结论 原代培养卵巢癌细胞经卡铂短期诱导后无血清悬浮培养,能进一步富集纯化卵巢癌类干细胞,可作为卵巢癌耐药研究的理想细胞模型。

关键词: 卵巢癌, 无血清悬浮培养, 卵巢癌类干细胞球, 卡铂

Abstract: Objective To isolate carboplatin-resistant human ovarian cancer stem-like cells and provide a cellular model for the development and screening of second-line drugs for carboplatin-resistant ovarian cancer. Methods Primary ovarian cancer cells were isolated and cultured from ovarian cancer tissues and ascites,and ovarian cancer stem-like cell spheres were isolated from serum-free suspension culture directly or after carboplatin induction. The expression of stem cell markers was evaluated by immunofluorescent assay or flow cytometry. Results The ovarian cancer stem-like cell spheres were isolated successfully from both ovarian cancer tissues and ascites and expressed high levels of stem cell markers CD133,ALDH1,ABCG2,and CD24. The abundance of CD24+ cells in the ovarian cancer stem cells was significantly increased upon short-term induction with carboplatin. Conclusion Ovarian cancer stem-like cells can be enriched and purified by short-term induction with carboplatin. This cell model can be used in research on chemoresistant ovarian cancer in the future.

Key words: ovarian cancer, serum-free suspension culture, ovarian cancer stem-like cell sphere, carboplatin

中图分类号: 

  • R737.31
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