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中国医科大学学报 ›› 2017, Vol. 46 ›› Issue (8): 729-733.doi: 10.12007/j.issn.0258-4646.2017.08.013

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miR-646 抑制骨肉瘤细胞的增殖和迁移的机制初探

裴祎 1,牟帅 2,薛峰 2,滕松龄 3,王广斌 2   

  1. 1 中国医科大学肿瘤医院,辽宁省肿瘤医院骨与软组织肿瘤科,沈阳 110042;2 中国医科大学附属盛京医院骨科,沈阳 110004;3 沈 阳医学院附属中心医院手外科,沈阳 110024
  • 收稿日期:2016-12-27 出版日期:2017-08-30 发布日期:2017-08-24
  • 通讯作者: 王广斌 E-mail:wanggb@sj?hospital.org
  • 作者简介:裴祎(1984 -),男,主治医师,硕士 .

Mechanism of Inhibition of Proliferation and Migration of Osteosarcoma Cells by miR-646

PEI Yi1,MU Shuai2,XUE Feng2,TENG Songling3,WANG Guangbin2   

  1. 1 Department of Bone and Soft Tissue Surgery,Cancer Hospital of China Medical University,Liaoning Cancer Hospital & Institute,Shenyang 110042,China;2 Department of Orthopaedics,Shengjing Hospital,China Medical University,Shenyang 110004,China;3 Department of Hand Surgery,Central Hospital Affiliated to Shenyang Medical Collage,Shenyang 110024,China
  • Received:2016-12-27 Online:2017-08-30 Published:2017-08-24

摘要: 目的 探讨 miR-646 对骨肉瘤细胞增殖和迁移的抑制作用。方法 通过 MTT 实验检测 miR-646 过表达或受到抑制后对 U2OS 细胞增殖的影响。Transwell 实验分析 miR-646 过表达或受到抑制后对 U2OS 细胞迁移的影响。MIRDB 预测 miR-646 与表皮生长因子受体(EGFR)的位点结合后,利用荧光素酶报告及实验检测 miR-646 对 EGFR 的靶向作用,并通过 Western blotting 检测 miR-646 对 EGFR 通路的作用。结果 MTT 结果表明,转染 miR-646 后 U2OS 细胞的增殖受到了显著地抑制,24 h 时抑制率为21.76%±1.05%,相反,当 miR-646 受到抑制后 U2OS 细胞的增殖得到了促进,24 h 时促进的比率为 18.89%±0.81%。Transwell 实验发现 miR-646 可以抑制骨肉瘤细胞系 U2OS 的迁移能力。随后 MIRDB 预测发现 miR-646 与 EGFR 的 3’UTR 区域具有结合位点,荧光素酶报告基因实验证明了 miR-646 可以直接作用于 EGFR。Western blotting 结果证明 miR-646 对 U2OS 细胞增殖迁移能力的抑制在一定程度上是通过 miR-646 对 EGFR 通路的抑制实现的。结论 miR-646 可以通过抑制 EGFR 通路的活性,进而抑 制骨肉瘤细胞的增殖和迁移功能。

关键词: miR-646, 骨肉瘤, 表皮生长因子, 迁移, 增殖

Abstract: Objective The mechanism of inhibition of the proliferation and migration of osteosarcoma cells by miR-646 was investigated. Methods The effects of miR-646 on the proliferation of U2OS cells were detected by MTT assay. The effects of miR-646 on U2OS cell migration were analyzed by Transwell assay. MIRDB was used to predict the binding sites of miR-646 and epidermal growth factor receptor(EGFR),which were confirmed in a luciferase reporter assay. Western blotting was conducted to detect the effect of miR-646 on the EGFR pathway. Results The MTT test showed that transfection of miR-646 significantly inhibited U2OS cell proliferation;the 24 h inhibition rate was 21.76%± 1.05%. In contrast, the 24 h promotion was 18.89%± 0.81%. Transwell experiments showed that miR-646 inhibited the migration of osteosarcoma U2OS cells. MIRDB predicted that miR-646 bound in the 3’-untranslated region of EGFR,and luciferase reporter gene experiments showed that miR-646 directly acted on EGFR. Western blotting experiments demonstrated that miR-646 inhibited the proliferation and migration of U2OS cells to some extent by inhibiting the EGFR pathway. Conclusion miR-646 can inhibit the proliferation and migration of osteosarcoma cells by inhibiting the EGFR pathway.

Key words: miR-646, osteosarcoma, epidermal growth factor receptor, migration, proliferation

中图分类号: 

  • R738.1
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