中国医科大学学报

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中国医科大学学报 ›› 2009, Vol. 38 ›› Issue (11): 827–.

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缺锌对增殖期大鼠生长板软骨细胞凋亡的影响

初立伟; 杨茂伟; 于江; 王铜浩; 李亚伦   

  1. 中国医科大学附属第一医院骨科
  • 出版日期:2009-12-20 发布日期:2010-04-14
  • 通讯作者: 杨茂伟 E-mail:mwyang@mail.cmu.edu.cn

Effect of Zinc Deficiency on the Apoptosis of Proliferative Growth Plate Chondrocyte in Rats

  • Online:2009-12-20 Published:2010-04-14

摘要:

目的探讨锌缺乏对增殖期大鼠肋生长板软骨细胞(RGC)凋亡的影响,为阐明锌对骨骼生长发育影响的机制提供科学依据。方法体外培养Wistar大鼠RGC,用0,5,10及20μmol/L的锌螯合剂N-N-N′-N′-4(2-吡啶甲基)乙二胺(TPEN)分别处理细胞12h。采用流式双染试剂盒研究早期凋亡和晚期凋亡细胞百分比。以5μmol/LTPEN作用6,12,24h,利用免疫组化技术检测细胞中凋亡诱导因子(AIF)的定位表达,并利用Western
      blot和实时定量PCR(real-time
      PCR)检测其表达水平的变化。结果随着TPEN浓度的增高,RGC细胞凋亡率也逐渐增加,各组早期凋亡和晚期凋亡细胞百分比增大,AIF的表达水平也逐渐升高。免疫组化染色结果显示在TPEN作用6h后,AIF已从线粒体迁出,12h及24h后,大部分AIF已从线粒体迁至细胞核。结论锌缺乏可以诱导RGC细胞凋亡,在凋亡的过程中AIF发挥着关键作用。

关键词: 锌, 生长板软骨细胞, 凋亡, 凋亡诱导因子, 锌, 生长板软骨细胞, 凋亡, AIF

Abstract:

Objective To study the effect of zinc deficiency on the apoptosis
      of prolierative growth plate chondrocytes and thus provide direct evidence
      for studying the mechanism of the effect of zinc in bone growth.Methods
      Growth plate chondrocytes were isolated from Wistar rats and treated with
      0,5,10,and 20 μmol/L of TPEN for 12 hours,respectively.The percentages of
      cells in early and late stage of apoptosis were determined by flow
      cytometry.Immunohistochemical staining was performed to identify the
      location of apoptosis-inducing factor(AIF).Real-time quantitative PCR and
      Western blot were used to detect AIF expression.Results The apoptosis rate
      of growth plate chondrocytes,the percentages of cells in early and late
      stage of apoptosis,and the expression level of AIF increased with the
      concentration of TPEN.AIF was transfered from mitochondria at 6 hours
      after exposure to TPEN and transfered into nuclei at 12 hours.Conclusion
      Zinc deficiency could induce the apoptosis of proliferative growth
      plate chondrocytes,in which AIF may play an important role.

Key words: zinc, growth plate chondrocyte, apoptosis, apoptosis inducing factor, zinc, Growth plate chondrocytes cell, apoptosis, AIF

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